En hurtigtest til kvalitativ påvisning af cotinine i human spyt.                                               

Kun til professionel in vitro-diagnostisk brug.

【ANBEFALET BRUG】

COT Rapid Test (Oral Fluid) er en hurtig kromatografisk immunoassay til påvisning af cotinine i human spyt med en cut-off-koncentration på 20 ng/mL.

Denne test giver kun et foreløbigt testresultat. En mere specifik kemisk metode skal anvendes for at opnå et bekræftet analytisk resultat. Gaschromatografi/massespektrometri (GC/MS) eller væskekromatografi/massespektrometri (LC/MS) er de foretrukne bekræftelsesmetoder. Klinisk vurdering og professionel dømmekraft bør anvendes på ethvert testresultat for misbrugsstoffer, især når foreløbige positive resultater anvendes.

【RESUME】

Cotinine er den første metabolit af nikotin, et toksisk alkaloid, der stimulerer de autonome ganglier og centralnervesystemet hos mennesker. Nikotin er et stof, som stort set alle i et tobaksrygende samfund udsættes for, enten gennem direkte kontakt eller passiv rygning. Ud over tobak er nikotin også kommercielt tilgængeligt som den aktive ingrediens i rygestopprodukter såsom nikotintyggegummi, nikotinplastre og næsespray.

Selvom nikotin udskilles i spyt, gør dets relativt korte halveringstid det til en upålidelig markør for tobaksbrug. Cotinine har derimod en væsentligt længere halveringstid, en høj korrelation med plasmaniveauer af Cotinine og er blevet identificeret som den bedste markør for rygestatus sammenlignet med måling af nikotin i spyt, kulmonoxid i udåndingsluften og thiocyanat i plasma. Detektionsvinduet for Cotinine i spyt ved en cut-off-grænse på 20 ng/mL forventes at være op til 1-2 dage efter nikotinindtag.

【PRINCIPPER】

COT Rapid Test (Oral Fluid) er en immunoassay baseret på princippet om konkurrerende binding. Stoffer, der kan være til stede i spytprøven, konkurrerer med stofkonjugatet om bindingsstederne på antistoffet.

Under testen migrerer spytprøven opad ved kapillærkraft. Hvis Cotinine er til stede i spytprøven i en koncentration under 20 ng/mL, vil bindingsstederne på de antistofbelagte partikler i testkassetten ikke blive mættet. De antistofbelagte partikler vil derefter blive fanget af det immobiliserede Cotinine-konjugat, hvilket resulterer i en synlig farvet linje i testlinjeområdet. Hvis Cotinine-niveauet er på eller over 20 ng/mL, vil alle bindingsstederne for anti-Cotinine-antistofferne blive mættet, hvilket forhindrer dannelsen af en farvet linje i testlinjeområdet.

En positiv spytprøve for stoffet vil derfor ikke generere en farvet linje i testlinjeområdet på grund af konkurrencen mellem stoffet og konjugatet, mens en negativ spytprøve eller en prøve med en stofkoncentration under cut-off-værdien vil generere en linje i testlinjeområdet.

For at fungere som en procedurekontrol vil en farvet linje altid fremkomme i kontrollinjeområdet, hvilket bekræfter, at en passende mængde prøve er blevet tilsat, og at membranens opsugning har fundet sted.

【REAGENSER】

Testen indeholder membranstrimler belagt med Cotinine-proteinkonjugater (renset bovint albumin) på testlinjen, et gedepolykolonalt antistof mod guld-proteinkonjugat på kontrollinjen samt en farvepude, der indeholder kolloidale guldpartikler belagt med en musemonoklonal antistof specifik for Cotinine.

【FORHOLDSREGLER】

• Må ikke anvendes efter udløbsdatoen.

• Testen skal forblive i den forseglede pose indtil brug.

• Alle prøver skal betragtes som potentielt farlige og håndteres på samme måde som et smitsomt middel.

·          Testenheden skal bortskaffes i overensstemmelse med gældende lovgivning

   【OPBEVARING】

Opbevares i den forseglede pose ved 2-30°C. Testen forbliver stabil indtil udløbsdatoen, der er trykt på den forseglede pose. Testenheden skal forblive i den forseglede pose indtil brug. MÅ IKKE FRYSES. Må ikke anvendes efter udløbsdatoen.

【PRØVEINDSAMLING OG FORBEREDELSE】

Spytprøven indsamles ved hjælp af den absorberende væge på testenheden. Følg de detaljerede brugsanvisninger nedenfor. Ingen andre indsamlingsenheder bør anvendes med denne test. Spytprøver kan indsamles på ethvert tidspunkt af dagen.

【BRUGSVEJLEDNING】

Lad testenheden, prøven og/eller kontrollerne nå stuetemperatur (15-30°C) før testen. Rådgiv donoren om at undgå at have noget i munden, herunder mad, drikke, tyggegummi eller tobaksprodukter, i mindst 10 minutter før indsamling af spytprøven..

1. Fjern hætten på nikotintesten og indsaml spytprøven som beskrevet i det følgende.
   Vigtigt: Placer tungen mod de øvre og nedre kæber og rødder for at berige den absorberende ende med spyttet. Indsæt enden i munden, og gnub aktivt rundt om tandkødet på begge sider af munden (op til 10-15 gange) for at hjælpe med mætningen af den absorberende ende.
   Placer den absorberende væge under tungen for at indsamle spyt, indtil du kan se den røde streg bevæge sig i testvinduet (normalt 2-4 minutter, men kan vare op til 10 minutter).
   Hvis du ikke kan se spyttet bevæge sig ned af testvinduet, så gentag proceduren som beskrevet ovenfor, indtil strømmen vises. Hvis der ikke vises nogen strøm efter tre forsøg, kassér testenheden, gennemgå proceduren med donoren og gentag testen med en ny enhed.
2. Placer testenheden på en ren og plan overflade.
3. Læs testresultatet efter 3-10 minutter.
   Hvis alle linjer er tydeligt synlige efter 3 minutter eller før, kan testen fortolkes som negativ og kasseres. Hvis nogen linjer ikke er synlige efter 3 minutter, bør testen læses igen efter 10 minutter.

【AFLÆSNING AF RESULTATER】

NEGATIV: To farvede linjer vises. En farvet linje skal være i kontrolområdet (C), og en anden farvet linje skal være i testområdet (T). Dette negative resultat indikerer, at Cotinine-koncentrationen er under det påviselige niveau på 20 ng/mL.

BEMÆRK: Intensiteten af farven i testlinjeområdet (T) kan variere afhængigt af Cotinine-koncentrationen i prøven. Derfor bør enhver farvetone i testlinjeområdet (T) betragtes som negativ.

POSITIV: En farvet linje vises i kontrolområdet (C). Ingen linje vises i testområdet (T). Dette positive resultat indikerer, at Cotinine-koncentrationen er over det påviselige niveau på 20 ng/mL.

UGYLDIG: Kontrollinjen vises ikke. Utilstrækkelig prøvemængde eller forkerte procedureteknikker er de mest sandsynlige årsager til, at kontrollinjen ikke vises. Gennemgå proceduren og gentag testen med en ny enhed. Hvis problemet fortsætter, stop med at bruge testenheden med det samme og kontakt os på info@stoftest.dk

【KVALITETSKONTROL】

En procedurekontrol er inkluderet i testen. En farvet linje, der vises i kontrolområdet (C), betragtes som en intern procedurekontrol. Den bekræfter, at der er tilstrækkelig prøvemængde, passende membranopslibning og korrekt procedureteknik.

【BEGRÆNSNINGER】

1. COT Rapid Test giver kun et kvalitativt, foreløbigt resultat. En sekundær analytisk metode skal anvendes for at opnå et bekræftet resultat. Gaschromatografi/massespektrometri (GC/MS) eller væskekromatografi/massespektrometri (LC/MS) er de foretrukne bekræftelsesmetoder.
2. Et positivt testresultat angiver ikke koncentrationen af stoffet i prøven eller administreringsvejen.
3. Et negativt resultat indikerer ikke nødvendigvis en stoffri prøve. Stoffer kan være til stede i prøven under cut-off niveauet for testen.

【YDEEVNEKARAKTERISTIKKER】

Nøjagtighed

En side-om-side sammenligning blev udført ved brug af COT Rapid Test og GC/MS ved cut-off niveauet på 20 ng/mL. Testning blev udført på 230 kliniske prøver, der tidligere blev indsamlet fra personer, der deltog i en stofscreeningstest. Følgende resultater blev tabuleret:

Analytisk Følsomhed

En Phosphat-pufferet saltvand (PBS) pool blev tilsat med stoffer for at opnå målkoncentrationer på ±50% cut-off, ±25% cut-off og 300% cut-off og blev testet med COT Rapid Test. Resultaterne er opsummeret nedenfor:

Analytisk Specificitet

Den følgende tabel viser forbindelser, der positivt detekteres i spyt ved hjælp af COT Rapid Test efter 3-10 minutter.

Krydsreaktivitet

En undersøgelse blev gennemført for at bestemme krydsreaktiviteten af testen med forbindelser, der blev tilsats i stoffri PBS lageropløsning. De følgende forbindelser viste ingen falske positive resultater ved testning med koncentrationer op til 100 µg/mL: